生物固氮是固氮微生物特有的一種生理功能,這種功能是在固氮酶的催化作用下進行的。檢測固氮酶的活性對于研究生物固氮工程有著至關(guān)重要的意義??泼鸦瘜W(xué)(CHEMISCI)依據(jù)乙炔還原法為廣大科研工作者提供豆科植物固氮酶活性檢測、海藻植物固氮菌檢測、土壤固氮酶活性檢測和微生物固氮酶活性檢測。
取適量樣品于帶異丁基膠塞的密封瓶中,抽出部分空氣,注入等量的標(biāo)準(zhǔn)乙炔氣體,調(diào)節(jié)光照時間和溫度進行培養(yǎng),培養(yǎng)后取密封瓶內(nèi)的氣體進行GC-FID檢測。
乙烯的含量采用外標(biāo)法定量,配置5個不同濃度的乙烯氣體進行檢測,根據(jù)濃度和峰面積建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,每一批次樣品要重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
質(zhì)控方法采用標(biāo)準(zhǔn)樣品法,每做10個樣品要用一個已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)乙烯氣體樣品進行檢測,同一個樣品平行測定五次,計算準(zhǔn)確度和精密度,要求準(zhǔn)確度和精密度在20%以內(nèi)。
檢測樣品色譜圖(海草樣本)
送樣要求
樣本 | 送樣量 | 運輸方式 |
植物樣本 | ≥0.2g | 干冰運輸 |
土壤樣本 | ≥0.2g | 常溫運輸 |
微生物樣本 | 已經(jīng)活化的固體平板或液體菌液(請確保菌種已長出) | 干冰運輸 |